Subsidie wordt uitsluitend verstrekt aan aanvragers die beschikken over een lidmaatschap bij de Federatie Dierenambulance Nederland om de activiteiten van een dierenambulance uit te voeren, voldoen aan het keurmerk Diervervoer van Stichting Dierkeur, een 24-uursbereikbaarheid en inzetbaarheid hebben, en voor zover dieren 's avonds en 's nachts niet naar een opvangcentrum kunnen worden gebracht, deze dieren tijdelijk kunnen opvangen.